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125I標記物的純化

    125I標記物反應后，標記物需進行分離純化以除去游離125I-和其他雜質(zhì)。純化標記物的方法有利用分子篩機制的凝膠過濾法、利用游離125I-與標記物分子極性差異進行吸附解離的離子交換層析法、按分子所帶電荷和直徑不同在電場作用下分子遷移速率不同進行分離純化的聚丙烯酰胺凝膠電泳法（PAGE）以及液相色譜法（HPLC）。

    以葡聚糖凝膠（如SephadexG-50）柱層析分離純化125I標記物為例：標記反應混合液經(jīng)柱層析時，需定時或定量逐管收集層析洗脫液，并用丁計數(shù)儀測定每管的放射性強度。通常zui先洗脫出的為聚合物雜質(zhì)放射峰，然后為含標記物的主放射峰，隨后即為游離125I-峰。

125I-標記物柱層析分離純化示意圖

Ⅰ．損傷和聚合標記物；Ⅱ．125I標記物；Ⅲ．游離125I-

    標記物貯存一段時間后可因脫碘和自身輻射造成蛋白質(zhì)破壞形成碎片，因而需對標記物重新純化。

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